消毒杀菌与灭菌试验的工作原理及流程

  ◆◆实验原理◆◆

  灭菌就是指消灭物件中全部微生物菌种的繁育体和芽胞的全过程。消毒是指用物理学、有机化学或生物体的方式杀掉微生物的全过程。

  灭菌的基本原理便是使蛋白质和核酸等分子伴侣产生转性，进而做到灭菌的功效，试验室中最常见的便是空气干燥灭菌和寒湿灭菌。

  空气干燥灭菌是运用高溫使微生物菌种细胞膜内的蛋白质凝结转性而做到灭菌的目地。体细胞内的蛋白质凝固性与其说自身的水分含量相关，在菌体遇热时，当自然环境和人体细胞内水分含量越大，则蛋白质凝结就越来越快，相反水分含量越小，凝结迟缓。因而，与寒湿灭菌对比，空气干燥灭菌所需温度高（160～170℃），时间长 （1～2h）。但干热灭菌温度不可以超出 180℃。不然，包容器的纸或棉塞便会烧糊，乃至造成点燃。

  髙压蒸气灭菌是将待灭菌的物件放到一个密闭式的充压灭菌锅内，根据加温，使灭菌锅隔套房的水沸腾而造成蒸气。待水蒸气大幅度地将锅内的强冷空气从气阀中驱尽，随后关掉自动排气阀，再次加温，这时因为蒸气不可以外溢，而提升了灭菌器内的工作压力，进而使熔点提高，获得高过 100℃的温度。造成菌体蛋白质凝结转性而做到灭菌的目地。

  在同一温度下，寒湿的除菌法律效力比空气干燥大。其因素有三：一是寒湿中病菌菌体消化吸收水份，蛋白质容易凝结，因蛋白质水分含量提升，所需凝结温度减少，二是寒湿的穿透性比空气干燥大，三是寒湿的蒸气有汽化热存有。这类汽化热，能快速提升被灭菌物件的温度，进而提升灭菌法律效力。

  ◆◆实验器材◆◆

  试验一所配置的培养液，细胞培养皿，培养皿，试管婴儿，塑料吸管，电热干燥箱、手提髙压灭菌锅等。

  ◆◆实验步骤◆◆

  1．高压蒸气灭菌

  (1) 最先将里层锅取下，再向表层锅内添加适量的水，使河面与三角搁物架齐平为宜。

  (2) 放回里层锅，并装进待灭菌物件 （培养液等）。留意不必装得太挤，以防妨碍蒸气商品流通而危害灭菌实际效果，三角烧瓶与试管婴儿口端均不必与桶壁触碰，以防凝结水打湿包口的纸而透人棉塞。

  (3) 加盖，并将盖紧的排气管塑料软管插进里层锅的排气管槽体。再以两组对称性的方法与此同时扭紧相对性的2个螺拴，使地脚螺栓紧松一致，勿使漏汽。

  (4) 用电量护或液化气加温，并与此同时开启自动排气阀，使水沸腾以清除锅内的强冷空气。待冷空气彻底排空后，合上自动排气阀，让锅内的温度随蒸气工作压力提升而慢慢升高。当锅内工作压力升到所得的工作压力时，操纵热原，保持工作压力至所需時间。

  (5) 灭菌所需时间到后，断开开关电源或关掉液化气，让灭菌锅内温度当然降低，当气压表的气体压力至“0”时，开启自动排气阀，旋松地脚螺栓，开启外盖，取下灭菌物件。

  2．空气干燥灭菌

   (1) 装进待灭菌物件

  将包装好的待灭菌物件（细胞培养皿，试管婴儿，塑料吸管等）放进电烘箱内，关好柜门。

   (2) 提温

  接入开关电源，拨动开关，开启电烘箱排出气孔，旋转控温控制器至信号灯亮，让温度慢慢升高。当温度升到 100℃时，关掉排出气孔。在加热历程中，假如绿灯灭掉，信号灯亮，表明箱里终止升温，这时假如还未做到需要的 160～170℃温度，则需旋转控制器使绿灯再亮，这般不断调整，直到做到所需温度。

   (3) 控温

  当温度升到 160～170℃时，借恒温控制器的自动控制系统，维持此温度 2h。

   (4) 减温

  断开开关电源、当然减温。

   (5) 拆箱取放

  待电烘箱内温度降至 70℃下列后，开启柜门，取下灭菌物件。