TOMY高压灭菌锅的使用注意事项

TOMY高压蒸汽灭菌的原理

　　TOMY高压蒸汽灭菌用途广，效率高，是微生物学试验中最常用的灭菌办法。这种灭菌办法是根据水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力到达1.05kg/cm2时，水蒸气的温度升高到121℃，经15～30min，可悉数杀死锅内物品上的各种微生物和它们的孢子或芽孢。一般培养基、玻璃器皿以及传染性标本和作业服等都可应用此法灭菌。

　　请注意高压蒸汽灭菌的原理：是根据水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。

　　压力：100KPa，水蒸气的温度：115℃，时刻：20min，各种微生物和它们的孢子

　　压力：147KPa，水蒸气的温度：121℃，时刻：15-30min ，各种微生物和它们的孢子或芽孢

　　压力：156KPa，水蒸气的温度：180℃，时刻：4h，热原质（Pyrogen）:热原质即菌体中的脂多糖

　　压力：156KPa，水蒸气的温度：250℃，时刻：45'，热原质（Pyrogen）:热原质即菌体中的脂多糖

　　压力：156KPa，水蒸气的温度：650℃，时刻：1'，热原质（Pyrogen）:热原质即菌体中的脂多糖

　　温度越高，需时越短，热穿透才能越强。一般确认115℃-121.3℃，对培养基的成分不产生损坏。

　　高压蒸汽锅灭菌运用细节

　　高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，经过加热，使灭菌锅隔套间的水欢腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后封闭排气阀，持续加热，此刻因为蒸气不能溢出，而添加了灭菌锅内的压力，然后使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而到达灭菌的意图。 在运用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的扫除是否完全极为重要，因为空气的胀大压大于水蒸汽的胀大压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。 所以饱和蒸汽的灭菌更完全！

　　一、高压灭菌锅运用前要水加到水位线；

　　二、将需灭菌的培养基、蒸馏水或其它器皿放入灭菌锅内，封闭锅盖，查看排气阀、安全阀状况（上下排气阀翻开安全阀关合然后加热，便利空气排出，上、下排气阀都同时处于开启状况待有水蒸汽从上、下阀溢出，此状况坚持7、8分钟后，即排出空气后 上排气阀关合 下排气阀调小 安全阀坚持关合状况 ），

　　三、翻开电源，查看参数设置是否正确，然后按下“work”键，灭菌锅开端作业；主动派冷气，到105℃时，底部排气阀门主动封闭，然后压力开端上升；

　　四、压力升至 0.15MPa（121℃）时，灭菌锅再次主动放气，然后开端记时，一般培养基灭菌20min，蒸馏水灭菌30min；

　　五、到达规则的灭菌时刻后，封闭电源，翻开放气阀缓慢放气；当压力指针降至 0.00MPa时，放气阀无蒸汽扫除时，方可开启锅盖。

　　六、注意事项

　　1、汽未放尽前，不得开启高压锅；

　　2、假如灭菌后的培养基在锅内不及时拿出，需在蒸汽放尽后将锅盖翻开，切忌将培养基封闭在锅内过夜。

　　3、压力表指针在0.05MPa以上时，不能过快放汽，以防止压力急速下降，液体滚沸，从培养容器中溢出。

　　4、操作进程，请注意安全，小心烫坏。

　　在一个标准大气压下水的沸点是100摄氏度 压力越高,与之对应压力下的沸点越高 这里是高压蒸汽锅,说明压力肯定大于一个标准大气压(通常情况下的地表面的大气压强就认为是一个标准大气压),也便是说高压蒸汽锅肯定要超越100摄氏度才能欢腾,才能产生蒸汽. 至少要比及水煮沸，排出一分钟左右的蒸汽后再把安全阀封闭，这样可以使高压蒸汽锅里的压力敏捷上升,本来欢腾的水因为压力的快速上升而停止欢腾,压力大,沸点高,水蒸汽就变成液体水,而放出很多的汽化潜热,便是高温高压的意图，然后到达灭菌的意图 原理在同一温度下，湿热的灭菌效能比干热大，其原因有三：

　　一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量添加，所需凝固温度降低，

　　二是湿热的穿透力比干热大；

　　三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100℃时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。这种潜热，能敏捷进步被灭菌物体的温度，然后添加灭菌效能。

　　在运用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的扫除是否完全极为重要，因为空气的胀大压大于水蒸汽的胀大压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。 假如压力未降到0时，翻开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基因为表里压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，形成棉塞沾染培养基而产生污染。 要100度以上,也便是对应压力下的沸点后才能使水剧烈欢腾,将锅内空气更多的扫除.

　　高温灭菌操作中常见过错的剖析

　　高温灭菌是指用热能杀死微生物。其原理是高温使原生质中的蛋白质变性、使酶失活，致使微生物死亡。高温灭菌首要有高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法和灼烧灭菌法几种。假如操作不妥，即达不到预期的灭菌效果。现就常见过错剖析如下。

　　1 TOMY高压蒸汽灭菌

　　蒸汽灭菌属湿热灭菌，因为湿热灭菌有潜能存在，被灭菌物体的温度比蒸汽的低，蒸汽在其表面凝结成水，放出潜能，可敏捷进步被灭菌物体的温度。又因为水和水蒸汽比空气的热容量大、导热快、穿透力强，所以，与干热灭菌比较，灭菌需求的温度低、时刻短。因为高压蒸汽灭菌法水蒸汽的温度随其所受压力的添加而升高，因而灭菌用的高温蒸汽都是经过加压获得的。

　　手提式高压灭菌锅操作中常见的过错有：

　　（1）排气不完全。在升压前应将锅内冷空气排净，因空气是热不良导体，若不排净，冷空气就会集合井滞留在灭菌锅中消毒筒的中下部，围绕在待灭菌物的周围。在这种情况下，假若锅内仅扫除一半空气，当压力表指针到达105Pa时，锅内实际温度仅能到达 112℃，比要求的 121℃低9℃之多，将导致灭菌不完全，或许形成大面积染菌。（主动的高压灭菌锅 上下排气阀 都要翻开 然后加热 排空气）

　　（2）排气软管没有按要求刺进灭菌筒的下部，或排气软管开裂、缺失。灭菌锅内的冷空气是经过排气软管排出的，上述情况将形成灭菌筒外的蒸汽直接经排气阀排出锅外，灭菌锅内的空气排放受阻。

　　（3）消毒筒内物品堆积太紧、太满，阻碍蒸汽的流转和热交流，使容器内升温减慢，形成物体内部灭菌不完全。

　　（4）升温过快。灭菌的时刻是以到达要求温度后的持续时刻计算的，但温度的升降进程相同起到灭菌的效果，升降温度过快会经过影响总的积温而影响灭菌效果。另外，升温过快，特别是运用外源蒸汽的情况下，会形成被灭菌物体内部升温滞后于压力表指示温度。

　　（5）灭菌的物体体积（容量）过大。组织培养中或惯例微生物试验中，高温蒸汽灭菌通常要在 121℃（即蒸汽压力为1kg／cm2或 15磅／寸2，或0.105MPa）下保温15min。这一规则仅适用于试管、三角瓶中小于200ml容量的。若体积太大，特别是固体培养基，会形成灭菌不完全，应适当延伸灭菌时刻。

　　（6）任意延伸灭菌时刻。规则的灭菌温度和时刻是经过科学试验确认的，只要按照正确的灭菌程序是能到达灭菌意图的。但在实践中常有人为了“确保完全灭菌”而任意延伸灭菌时刻。这样忽视了灭菌进程中温度对培养基成分的损坏效果，是得不偿失的。

　　（7）温度不稳定。灭菌进程中温度（压力）忽高忽低，特别是手提式电能灭菌锅，它没有控温设备，难于控温。操作者可配置调压变压器，经过调理电压控温。此外，还常遇到灭菌锅内加水太少（应加 2～3L）；容器内装的溶液量过多（应少于2／3）；安全阀失灵等问题。

　　2 干热灭菌

　　干热灭菌指在烘箱160℃温度下，维持 2h，消除物体上的微生物的办法。常见过错有：

　　（1）将灭菌物品（如培养皿）堆摞放置，且堆得过满、过挤，阻碍空气流转和热量的传递、交流；

　　（2）升温时不翻开箱顶通风孔，影响箱内冷空气及水汽的扫除；

　　（3）高温（80℃以上）下开箱取物，热蒸汽喷出形成烧伤及突然降温，使玻璃器皿破裂；

　　（4）温度过高（180℃以上）形成包装纸、棉塞焦化，失去防菌或过滤效果；

　　（5）将不耐热的枪头、离心管、试管帽、滤器等塑料制品放入烤箱内灭菌，而致熔化。

　　3 灼烧灭菌

　　即直接使用火焰将微生物灼烧致死。特点：简便、敏捷、完全。首要用于接种东西及器皿的灭菌。如接种杯、镊子、剪刀、玻棒、瓶口及其封口用的铝箔的灭菌常见的过错有：

　　（1）接种东西的灭菌规模不行，如长度不行，灼烧时没有旋转形成表里侧灭菌不匀；

　　（2）接种东西没有降至常温即用于接种；

　　（3）对玻璃器皿灼烧过度，使棉塞、封口膜焦化或熔化